网上有关“离子交换层析分离两性化合物的原理”话题很是火热，小编也是针对离子交换层析分离两性化合物的原理寻找了一些与之相关的一些信息进行分析 ，如果能碰巧解决你现在面临的问题 ，希望能够帮助到您。
离子交换层析分离两性化合物的原理介绍如下：
离子交换层析法（ionexchangechromatography，简称IEC）是从复杂的混合物中 ，分离性质相似大分子的方法之一 ，依据的原理是物质的酸碱性、极性，也就是所带阴阳离子的不同 。电荷不同的物质 ，对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力 ，改变冲洗液的离子强度和pH值，物质就能依次从层析柱中分离出来 。
离子交换层析法大致分为5个步骤：
1.离子扩散到树脂表面。
2.离子通过树脂扩散到交换位置 。
3.在交换位置进行离子交换；被交换的分子所带电荷愈多 ，它与树脂的结合愈紧密 ，也就愈不容易被其它离子取代 。
4.被交换的离子扩散到树脂表面。
5.冲洗液通过，被交换的离子扩散到外部溶液中 。
离子交换树脂的交换反应是可逆的 ，遵循化学平衡的规律 ，定量的混合物通过管柱时，离子不断被交换，浓度逐渐降低 ，几乎全部都能被吸附在树脂上；在冲洗的过程中 ，由于连续添加新的交换溶液，所以会朝正反应方向移动 ，因而可以把树脂上的离子冲洗下来 。
如果被纯化的物质是氨基酸类的分子 ，则分子上的净电荷取决于氨基酸的等电点和溶液的pH值，所以当溶液的pH值较低 ，氨基酸分子带正电荷 ，它将结合到强酸性的阳离子交换树脂上；随着通过的缓冲液pH逐渐增加，氨基酸将逐渐失去正电荷 ，结合力减弱 ，最后被洗下来。
由于不同的氨基酸等电点不同，这些氨基酸将依次被洗出 ，最先被洗出的是酸性氨基酸 ，如aparticacid和glutamicacid（在约pH3~4时），随后是中性氨基酸，如glycine和alanine 。碱性氨基酸如arginine和lysine在pH值很高的缓冲液中仍带有正电荷 ，因此这些在约pH值高达10~11时才出现 。
一 、目的
学习用阳离子交换树脂柱分离氦基酸的操作方法和基本原理.
二 、原理
各种氨基酸分子的结构不同,在同一PH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果.
三、器材
1 、20cmX 1cm层析管 2 、试管
3、吸管． 4 、恒压洗脱瓶
5 、部分收集器 6、搪磁杯
7 、电炉 8 、分光光度计
四、试剂和材料
1 、．苯乙烯磺酸钠型树脂（强酸 lx 8,l00一200目,可用上海华东化工学院产品）
2 、2 mol／L盐酸溶液
3、2mol／L氢氧化钠溶液
4、标准氨基酸溶液 天冬氨酸 、赖氨酸和组氨酸均配制成 2 mg／mL的0.1M盐酸溶液.
5 、混合氢基酸溶液将上述天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸溶液按1：2．5：10的比例混合.
6 、柠檬酸－氢氧化钠一盐酸冲液（pH5.8）,钠离子浓度0 .45M）
取柠檬酸（C6O7H8.H20 ）14.25g 、氢氧化钠9.30g和 浓盐酸 5．25 mL溶于少量水后,定容至 500 mL,冰箱保存.
7、显色剂 2 g水合茚三酮溶于 75mL乙二醇单甲醚中．加水至 100 mL.
8 、50%乙醇水溶液
五 、操作
1、层析柱的准备：将强酸型阳离子交换树脂用氢氧化钠处理成Na+型后洗至中性（处理方法见第三篇实验十二）．搅拌一小时后装成一个直径1cm．高 16～18 cm的层析柱.
2 、氨基酸的洗脱：用P H5.8的柠檬酸缓冲液流洗平衡交换住（装置如图）.调节流速为 0.5 mL／min,流出液达床体积的4倍时即可上样.由柱上端仔细加人氨基酸混合液0．25—0．5 mL,同时开始收集流出液.当样品液弯月面靠近树脂顶端时,即刻加入0.5 mL拧檬酸缓冲液冲洗加样品处.待缓冲液弯月面靠近树脂顶端时.再加入0．5 mL缓冲液.如此重复两次,然后用滴管小心注入柠檬酸缓冲液（切勿搅动床面）,并将柱与洗脱瓶和部分收集器相连.开始用试管收集洗脱液,每管收集lmL．共收集60一80管.
3 、氨基酸的鉴定：向各管收集液中加lmL水合茚三酮显色剂并混匀,在沸水浴中淮确加热15分钟后冷却至室温．再加15 mL的50％乙醇液.放置10分钟.以收集液第2管为空白,测定A570nm波长的光吸收值.以光吸收值为纵坐标,以柱洗脱体积为横坐标绘制洗脱曲线.以已知3种氨基酸的纯溶液为样品,按上述方法和条件分别操作,将得到的洗脱曲线与混合氨基酸的洗脱曲线对照．可确定3个峰的大致位置及各蜂为何种氨基酸.
关于“离子交换层析分离两性化合物的原理 ”这个话题的介绍 ，今天小编就给大家分享完了，如果对你有所帮助请保持对本站的关注！
本文来自作者[觅珊]投稿，不代表双子号立场，如若转载，请注明出处：http://qs.macaijun.com/shuangzi/1391.html
评论列表（3条）
我是双子号的签约作者“觅珊”
本文概览：网上有关“离子交换层析分离两性化合物的原理”话题很是火热，小编也是针对离子交换层析分离两性化合物的原理寻找了一些与之相关的一些信息进行分析，如果能碰巧解决你现在面临的问题，希望...
文章不错《离子交换层析分离两性化合物的原理》内容很有帮助